Elektroforez: nədir, nə üçündür və necə edilir
MəZmun
Elektroforez, xəstəliklərin diaqnozu qoyula biləcəyi, zülal ekspresiyası təsdiqlənə biləcəyi və ya mikroorqanizmlərin təsbit ediləcəyi molekulların ölçülərinə və elektrik yükünə görə ayrılması məqsədi ilə həyata keçirilən bir laboratoriya üsuludur.
Elektroforez laboratoriya işində və tədqiqat layihələrində istifadə olunan sadə və ucuz bir prosedurdur. Elektroforezin məqsədinə görə, məsələn, diaqnoz qoymaq üçün başqa testlər və müayinələr aparmaq lazım ola bilər.
Bu nə üçündür
Elektroforez sadə və ucuz bir texnika olduğundan həm tədqiqat layihələrində, həm də diaqnozda fərqli məqsədlər üçün edilə bilər.Beləliklə, elektroforez:
- Bu tətbiq tədqiqat layihələrində daha çox yayılması ilə virusları, göbələkləri, bakteriyaları və parazitləri müəyyənləşdirin;
- Atalıq testi;
- Zülalların ifadəsini yoxlayın;
- Məsələn, lösemi diaqnozunda faydalı olan mutasiyaları müəyyənləşdirin;
- Oraq hüceyrəli anemiya diaqnozunda faydalı olan dövran edən hemoglobin növlərini təhlil edin;
- Qanda mövcud olan protein miqdarını qiymətləndirin.
Elektroforezin məqsədinə görə, diaqnozu başa çatdırmaq üçün həkim üçün digər tamamlayıcı testlərin aparılması lazım ola bilər.
Necə edilir
Elektroforezi həyata keçirmək üçün transiluminator kimi də bilinən bir UV və ya LED işıq avadanlığına əlavə olaraq təyinatı, elektroforez tamponu və yastığı, molekulyar ağırlıq göstəricisi və bir floresan boyasından asılı olaraq poliakrilamid və ya agaroz ola bilən jel tələb olunur.
Jel hazırladıqdan sonra, xüsusi bir obyekt qoyulmalıdır ki, xalq arasında tarak adlanan quyular jeldə hazırlansın və jel qurulsun. Jel hazır olduqda, yalnız maddələri quyulara tətbiq edin. Bunun üçün quyulardan birinə bir molekulyar ağırlıq markeri, nə olduğunu bilən maddə olan müsbət nəzarət, reaksiyanın etibarlılığını təmin edən mənfi nəzarət və analiz ediləcək nümunələr qoyulmalıdır. Bütün nümunələr bir floresan boyası ilə qarışdırılmalıdır, çünki bu yolla transilluminatorun üzərindəki lentləri görüntüləmək mümkündür.
Nümunələri olan jel spesifik tampon məhlulu olan elektroforez qabına qoyulmalı və sonra elektrik cərəyanı və nəticədə ayrılma hissəcikləri üçün vacib olan potensial fərq olması üçün cihaz açılmalıdır. yük və ölçü. Elektroforetik işləmə müddəti prosedurun məqsədinə görə dəyişir və 1 saata qədər davam edə bilər.
Müəyyən olunmuş vaxtdan sonra transilluminatordan elektroforetik axının nəticəsini görmək mümkündür. Jel ultrabənövşəyi və ya LED işığının altına qoyulduqda, bantlama nümunəsini vizuallaşdırmaq mümkündür: molekul nə qədər böyükdürsə, miqrasiyası o qədər az olur, quyuya yaxınlaşır, molekul nə qədər yüngül olarsa, miqrasiya potensialı da bir o qədər artır.
Reaksiyanın doğrulana bilməsi üçün pozitiv idarəetmə zolaqları görüntülənməli və mənfi nəzarətdə heç bir şey görünməməlidir, əks halda çirklənmənin olduğuna işarədir və bütün proses təkrarlanmalıdır.
Elektroforez növləri
Elektroforez müxtəlif məqsədlər üçün edilə bilər və təyinatına görə ən çox yayılmış poliakrilamid və agaroz olan bir neçə növ gel istifadə edilə bilər.
Mikroorqanizmləri müəyyənləşdirmək üçün elektroforez tədqiqat laboratoriyalarında daha çox görülür, bununla birlikdə diaqnostik məqsədlər üçün elektroforez, əsas elektroforez növləri olan zülalların miqdarının artması ilə inkişaf edən hematoloji xəstəlikləri və xəstəlikləri təyin etmək üçün istifadə edilə bilər:
1. Hemoglobin elektroforezi
Hemoglobin elektroforezi, hemoglobin sintezi ilə əlaqəli xəstəliklərin mövcudluğunu müəyyənləşdirməyə imkan verən qan içində dolaşan müxtəlif hemoglobin növlərini təyin etmək üçün aparılan bir laboratoriya üsuludur. Hemoglobin növü elektroforez vasitəsi ilə müəyyən bir pH səviyyəsində, ideal olaraq 8.0 ilə 9.0 arasında, normal naxışla müqayisə edilə bilən bant nümunəsi ilə anormal hemoglobinin təyin edilməsinə imkan verir.
Bunun üçün nə edilir: Hemoglobin elektroforezi, talassemiyanı fərqləndirməkdə faydalı olmaqla yanaşı, oraq hüceyrə anemiyası və hemoglobin C xəstəliyi kimi hemoglobin sintezi ilə əlaqəli xəstəlikləri araşdırmaq və diaqnoz qoymaq üçün aparılır. Hemoglobin elektroforezini necə şərh edəcəyinizi öyrənin.
2. Zülal elektroforezi
Protein elektroforezi, həkim tərəfindən qanda dolaşan zülalların miqdarını qiymətləndirmək və beləliklə xəstəlikləri təyin etmək üçün tələb olunan bir imtahandır. Bu müayinə, digər maddələr arasında zülallardan ibarət olan qan hissəsi olan plazma əldə etmək üçün santrifüj edilmiş bir qan nümunəsindən aparılır.
Elektroforezdən sonra bantların bir nümunəsi görülə bilər və daha sonra diaqnoz üçün əsas olan zülalların hər bir hissəsinin miqdarının göstərildiyi bir qrafik.
Bunun üçün nə edilir: Zülal elektroforezi, həkimə çoxsaylı miyelom, dehidrasiya, siroz, iltihab, qaraciyər xəstəliyi, pankreatit, lupus və hipertansiyonun meydana gəlməsini bant şəkli və müayinə hesabatında göstərilən qrafikə görə araşdırmağa imkan verir.
Bunun necə edildiyini və protein elektroforezinin nəticəsini necə başa düşəcəyini anlayın.